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Biobanking: key aspects and benefits for research Vojtech Parraka*, Kristina Nemergutovaa, Ladislav Sopkoa, Angelika Batorovaa, Marcela Skrakovaa, Peter Secnikb, Peter Secnik Jrb, Lucia Parrakovac aClinic of Hematology and Transfusiology, St Cyril and Methodius Hospital, Antolska 11, SK-851 07, Bratislava, Slovak Republic bSK-Lab s.r.o., Partizanska 15, SK-984 01, Lucenec, Slovak Republic cBiochemical Immunotoxicology Group, Institute of Medical Biochemistry, Medical University of Innsbruck (MUI), Innsbruck, Austria *E-mail: vojtech.parrak@savba.sk Abstract Therapeutic drug monitoring (TDM) and biobanking are relatively new areas that are gaining attention and gradually becoming more established in practice. Keywords biobanking, pre-analytical phase, analytical phase, post-analytical phase, TDM. rDUVLAESCI-MS/MSI: a novel approach for direct analysis of biological surfaces Barbora Papouškováa, Filip Gregara, Jakub Grepla, Andrea Horniakováb, Karel Lemra, Petr Fryčáka, Tomáš Pluháčeka* aDepartment of Analytical Chemistry, Faculty of Science, Palacký University,17. listopadu 12, 779 00 Olomouc, Czech Republic bDepartment of Pharmaceutical Analysis and Nuclear Pharmacy, Faculty of Pharmacy, Comenius University in Bratislava, Odbojárov 10, 832 32 Bratislava, Slovak Republic *E-mail: tomas.pluhacek@upol.cz Abstract Ambient mass spectrometry has significantly enhanced the detailed insight into the molecular composition of complex biological surfaces under native conditions, requiring minimal sample preparation (Venter et al., 2008). In the last decade, the laser ablation/desorption followed by the post-ionization of the desorbed neutral aerosol by an ionization source, particularly electrospray ionization, atmospheric pressure chemical ionization, and atmospheric pressure photoionization, has been strongly favored. The presented work introduces a novel, fully automated remote deep-ultraviolet laser ablation coupled with electrospray ionization−atmospheric pressure chemical ionization (rDUVLAESCI) source, which can be easily used for either spot analysis or MSI of a wide range of polarity and molecular weights of organic molecules.

Melanocortin (MC) receptors are widely distributed throughout the body of chicken, like in mammals, and participate in a wide range of physiological functions. To clarify the pharmacological impact of ligands acting in the MC system, we expressed the chicken MC1, MC2, MC3, MC4 and MC5 (cMC1–5) receptors in eukaryotic cells and performed comprehensive pharmacological characterization of the potency of endogenous and synthetic melanocortin peptides. Remarkably, the cMC receptors displayed high affinity for ACTH‐derived peptides and in general low affinity for α‐MSH. It is evident that not only the cMC2 receptor but also the other cMC receptors interact with ACTH‐derived peptide through an epitope beyond the sequence of α‐MSH. The synthetic ligand MTII was found to be a potent agonist whereas HS024 was a potent antagonist at the cMC4 receptor, indicating that these ligands are suitable for physiological studies in chicken. We also show the presence of prohormone convertase 1 (PC1) and PC2 genes in chicken, and that these peptides are coexpressed with proopiomelanocortin (POMC) in various tissues. British Journal of Pharmacology (2004) 143, 626–637. doi:10.1038/sj.bjp.0705900

Despite the fact that vessels have sparse cholinergic innervation, acetylcholine (ACh), the primary neurotransmitter of parasympathetic nervous system, has been commonly used in physiological experiments to assess vascular function. ACh is hydrolyzed by two cholinesterases (ChE), namely acetylcholin-esterase and butyrylcholinesterase (BChE). However, little is known about these enzymes in blood vessels. The aim of the project was to characterize the expression and activity of ChE in rat aorta. As the effect of ACh on vascular tone depends on the presence of endothelium, Wistar rats were used as a model with intact endothelium and spontaneously hypertensive rats as a model of impaired endothelial function. Relative expressions of both ChE in different parts of the aorta were determined using RT-qPCR. Enzyme activities were assessed in tissue homogenates by Ellman's assay. Here we showed that both ChE are present in each part of rat aorta, while mRNA is more abundant for BChE than for AChE, irrespective of aortic compartment or genotype. Normotensive Wistar rats possess higher aortic mRNA expression and activity of BChE compared to SHR. We concluded that BChE is the dominant type of ChE in rat aorta and it might play an important role in the regulation of vascular tone

L'objectif du présent travail était d'étudier les mécanismes de la régulation fonctionnelle à court terme, ainsi que le devenir du récepteur hMC2R à l'ACTH. L'ACTH est un puissant stimulus qui agit sur la glande surrénale en stimulant la sécrétion d'hormones stéroïdiennes. Même si de multiples études ont été effectuées sur la transduction du signal déclenchée par l'ACTH ainsi que sur ses effets au niveau de la stéroïdogénèse, aucune étude n'est parue sur la régulation à court terme du hMC2R. Ceci est dû aux difficultés techniques rencontrées au cours des études avec ce récepteur, notamment des problèmes d'expression hétérologue et le manque d'un anticorps spécifique. Le but de cette étude était de comprendre par quels mécanismes est contrôlée la signalisation du hMC2R en choisissant des stratégies appropriées pour surpasser les difficultés techniques. Nous avons tout d'abord tenté d'exprimer le hMC2R dans la lignée cellulaire HEK293. Pour contourner le manque d'anticorps spécifique dirigé contre le hMC2R, la stratégie de fusion du domaine N-terminal extracellulaire du récepteur à l'épitope c-myc a été employée. Cette construction est exprimée à la membrane plasmique des cellules HEK293, mais n'est pas fonctionnelle en terme du couplage à la production d'AMPc, son principal second messager. Ceci peut être causé par l'absence de protéine accessoire du hMC2R appelée MRAP, ou d'autres protéines encore inconnues. Par contre, MRAP est exprimé dans les cellules M3 de mélanome de souris qui ont été choisies comme système d'expression hétérologue du hMC2R. Le récepteur exprimé dans ces cellules est correctement adressé à la membrane et retient sa fonctionnalité dans les cellules transfectées de façon transitoire et stable. Finalement, le mécanisme d'internalisation du hMC2R a été étudié. Nos résultats montrent que l'endocytose du hMC2R est cavéolae-indépendante, mais passe plutôt par la voie des puits tapissés de clathrine. De plus, le hMC2R internalise de façon β-arrestine-dépendante. La dynamique des mouvements membranaires du récepteur dans les cellules vivantes en temps réel a été étudiée avec le hMC2R hybride GFP suite à l'exposition à l'ACTH 10 nM grâce à la technique TIRF. Cette étude a confirmé les résultats précédents, le hMC2R couplé à la GFP subit une internalisation avec un maximum à 30 min d'exposition à l'agoniste. (Abstract shortened by UMI.)

On the occasion of the 70th anniversary of its founding, the Institute of Ethnology of the Slovak Academy of Sciences prepared as one of its events an international scientific conference entitled Ethnology in the Third Millennium: Topics, Methods, Challenges, held on 19-21 Oct 2016 in the SAS Congress Centre at Smolenice Castle. Bitusikova et al discuss the highlights of the conference.

Review of: TATIANA PODOLINSKÁ, TOMÁŠ HRUSTIČ (Eds.): Čierno-biele svety. Rómovia v majoritnej spoločnosti na Slovensku Bratislava, Ústav etnológie SAV, VEDA, 2015, 597 s JIŘÍ WOITSCH, ADÉLA JŮNOVÁ MACKOVÁ A KOLEKTÍV: Etnologie v zúženém prostoru Etnologický ústav Akademie věd České republiky, v. v. i., Praha 2016, 498 s. VLADIMIR PENČEV: Bălgarskite obštnosti v Sredna Evropa. Formirane, bituvane, identičnosti. [Bulharské komunity v strednej Európe. Formovanie, existencia, identity]. Paradigma, Sofia 2017, 231 s. PETR JANEČEK: Mýtus o Pérákovi. Městská legenda mezi folklorem a populární kulturou. Argo, Praha 2017, 360 s. MILAN JELÍNEK: Memoáry 1942 – 1971 (Od okupace do okupace) Moravské zemské muzeum, Brno 2018, 396 s. PETR ČÍHAL (Ed.): Erotika v lidové kultuře Slovácké muzeum v Uherském Hradišti, 2017, 366 s. IVETA ZUSKINOVÁ: Liptov. Ovčiarstvo v Liptove. Spoločnosť priateľov Múzea liptovskej dediny. Liptovský Hrádok 2018, 227 s.