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[目的]探讨miR396在落叶松体细胞胚胎发生中的功能。以期该研究能为解决体胚发育中子叶畸形胚与生根率低的问题提供新的视角,同时也为进一步揭示体胚发育的分子调控网络做基础铺垫。[方法]构建pre-miR396超表达载体,通过农杆菌介导侵染,将pre-miR396转入落叶松胚性细胞中,筛选稳定抗性细胞系。在DNA与RNA水平上,对抗性细胞系进行的鉴定、检测,同时统计比对其与野生细胞系间发芽率、叶片数目以及生根率的差异。[结果]在抗性细胞系基因组中,扩增出HTP与miR396的特异性片段,且无农杆菌Virg基因片段。RNA表达水平上,抗性系pre-miR396与miR396表达皆增加,而靶基因La GRFs的表达量下调。统计表明抗性系胚的发芽率、生根率、叶片数目畸形率分别为70.60%、0.60%、37%,而野生型分别为92.50%、10.55%、4%,抗性系胚的发芽率、生根率显著降低（Sig.=0.000）,叶片数目畸形率显著增加（Sig.=0.000）。[结论]miR396在落叶松体细胞胚胎发生过程中,可能通过负调节靶基因La GRFs的表达或者通过La GRFs影响与它相互作用的基因,参与体胚子叶原基细胞代谢,从而影响了子叶与叶片的发育;通过负调节La GRFs或者其它与根部发育相关的靶基因,影响了根端分生区细胞的活动,参与调控根的发育。

在甘肃小陇山林业科学研究所苗圃,系统研究了IBA、NAA、ABT对不同蓝云杉品种的扦插生根能力。研究结果表明：蓝云杉插穗愈伤始期为扦插后10 d,插后30 d开始生根,高峰期在插后40 70 d,80 d时扦插生根率达到97%。蓝云杉5个品种间扦插生根率和平均根长差异显著,品种间生根数量存在极显著的差异。插穗处理时间是影响蓝云杉生根率的主导因子。侧枝类型对生根影响差异极显著,一级侧枝生根率达到100%,二级侧枝生根率为88.97%。插穗长度对蓝云杉平均根长的影响差异不显著,但生根数量和根系效果指数存在极显著差异。插穗年龄对生根率的影响差异不显著。蓝云杉扦插的最优配方为,剪取采穗母树上1龄的8 10 cm长的一级侧枝,用IBA100 mg.L-1的浸泡0.5 h。

以野生长蕊杜鹃半木质化茎段为试材,采用植物生长激素KIBA,KNAA和Hormodin对插穗进行处理,测定不同生根期内源激素IAA、GA3、ZR、ABA含量,对扦插不同时期插穗茎段进行电镜扫描。结果表明：先快蘸液态KNAA（3 000mg·L-1）,再迅速蘸取粉状Hormodin#1处理对插条生根具有显著影响,插穗生根率达到了81.25%;较高浓度的内源IAA含量有利于根原基分化形成,GA3含量上升与插穗愈伤组织的诱导、不定根的形成呈正相关性,低水平的ABA更有利于长蕊杜鹃扦插生根;插穗在根原基分化和愈伤组织形成时期消耗內源ZR,在不定根长出后自身合成ZR;通过对淀粉粒研究表明扦插期补充糖类物质是必要的,簇状晶体产生表明钙调控等生理机制形成。

在计算机智能控制温室中,保证生根期空气温度18 28℃,空气相对湿度90%95%,以圆基长果楸为材料进行了楸树嫩枝扦插对比试验并对生根率及生根性状进行了研究。对比了ABT-1和NAA两种激素的不同浓度、不同处理方法、不同处理时间的组合,以及泥炭、珍珠岩、河沙、蛭石不同配比的基质组合对生根的影响。结果表明：1 000 mg.kg-1ABT-1或1 000 mg.kg-1NAA滑石粉稀释粉剂速蘸的激素处理对楸树嫩枝扦插较适宜;楸树嫩枝扦插的最佳基质配方为泥炭∶珍珠岩=1∶1;采用该激素处理和基质配方组合的楸树嫩枝扦插平均生根率达83%。

对28年生的撑麻7号竹的离体快速繁殖技术进行了系统研究，结果发现：降低培养基中大量元素用量，提高BA质量浓度有利于形成丛芽；在按正交设计的9组增殖培养基中，芽的增殖率差异不显著，芽的生长量相差近4倍，而且凡配方中加有KT的苗的生长均比同质量浓度BA而未加KT的苗要好，表明KT有促进生长的作用；经反复试验比较，认为3／4MS(m)+KT1.25mg·L^-1较适合增殖培养；还发现试管苗在萌发新芽时最易生根，采取先将苗生根培养20—30d后，转入增殖培养5—7d，可以使苗同步地萌发新芽，此时再将苗转人生根培养，采取2次生根的办法使生根率达到78．2％，从而解决了试管苗生根时大量死亡的问题。

在无激素处理的条件下，１．５年生幼龄母株的插穗易于生根，平均生根率达９６．０％以上，且发根最大，偏根率低；４．５年生时，插穗生根率极显著低于１．５年生母株，而与８．５年生母株无显著差异；１２．５年生母株插穗生根率又极显著低于８．５年生母株。母株年龄与插穗生根率和偏根率分别呈显著的负相关（ｒ＝－０．９６５２）和极显著正相关（ｒ＝０．９９９３），但与生根量和平均最长根长度无显著相关。插穗基部切削方式不

This study aimed to investigate the effects of different cutting facilities, cutting time and hormone treatments on the sumval and rooting of Plumbago au- riculata summerwood cuttings. The results showed that a new type of cutting facility used in this study significantly improved the survival rate of P. auriculata sum- merwoed cuttings ; the best time for summerwood cutting of P. auriculata was May; various hormone treatments significantly improved the rooting rate of P. auricu- /ata summerwood cuttings; the optimal concentrations of NAA, IAA and IBA were 1 000, 1 500 and 1 500 mg/L, respectively. This study provided scientific basis for the establishment of summerwoed cutting propagation technology system of P. auriculata.