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一株野生马来穿山甲源奇异变形杆菌的分离鉴定及生物学特性分析
为查明野生动物保护协会送检的1只野生马来穿山甲(Manis javanica)的死亡原因,对其进行剖检,从肺脏组织中分离得到1株病原菌。对分离菌株进行革兰氏染色、生化试验、16S rRNA同源性分析、药敏试验、耐药基因检测、毒力基因检测和小鼠致病性试验等研究。结果显示:分离菌株在麦康凯、SS、血琼脂和LB培养基上均能生长;革兰氏染色镜检为阴性短杆菌;生化鉴定和16S rRNA同源性分析鉴定该菌株为奇异变形杆菌(Proteus mirabilis),命名为YN2018株;生长曲线表明该菌株在2 h后进入对数生长期,16 h后进入稳定期;该菌株对头孢他啶、头孢噻肟和大观霉素较敏感,对庆大霉素、阿米卡星、阿莫西林、妥布霉素和链霉素中度敏感,对罗红霉素、多西环素和复方新诺明等14种抗菌药物耐药;该菌株含有aadA1、aadB、sul1、sul2和dfrA1耐药基因,并携带有mrpA、rsbA、ureC、zapA、rsmA、hpmA、fliL、ucaA、pmfA和atfA毒力基因;小鼠接种菌株浓度为8.50×108、1.70×109、3.40×109、6.80×109、1.36×1010 cfu/mL的死亡率分别为0、50%、75%、100%、100%;死亡小鼠肝脏和肺脏组织病理切片显示发生局灶性细胞坏死及炎性细胞浸润。分离得到的奇异变形杆菌具有多重耐药和强致病性,可能是导致野生马来穿山甲死亡的原因。
圈养孟加拉虎脂肪间充质干细胞的分离培养和生物学特性
圈养孟加拉虎(Panthera tigris tigris)是保护该濒危物种的有效途径,但限制性的圈养环境导致圈养虎的健康问题日益凸显,尤其是肾炎,当前的治疗方法预后效果较差。为分离获取、鉴定并培养具有治疗孟加拉虎肾炎治疗潜力的孟加拉虎脂肪间充质干细胞,通过采集孟加拉虎的脂肪组织,利用Ⅰ型胶原酶消化法分离脂肪间充质干细胞并进行传代培养;采用CCK8法测定P3、P6和P9代细胞活性并绘制生长曲线;采用PCR法扩增间充质干细胞表面特殊标记物基因;通过成脂肪和成骨诱导分化试验分别测定脂肪间充质干细胞的成脂与成骨诱导分化能力。结果发现:孟加拉虎脂肪间充质干细胞为长梭形,折光性较好,生长情况良好;P3、P6和P9代细胞生长曲线呈典型的“S”型,符合间充质干细胞生长曲线规律;PCR扩增得到CD44、CD90、CD105和CD29特异性表面标记物基因;诱导分化试验表明,脂肪间充质干细胞具有成脂成骨诱导分化能力。综上,分离培养获得的细胞符合间充质干细胞特征,表明成功分离出孟加拉虎脂肪间充质干细胞。虎脂肪间充质干细胞的成功分离将作为一种潜在的细胞治疗手段,可能为虎肾炎的治疗提供新的选择,有望在维持虎的健康状态和延长寿命方面产生积极的临床效果。
人肺腺癌细胞系Ch-Huang-1的建立和生物学特性研究
背景与目的肺癌是严重威胁人类生存和发展的恶性疾病之一,本研究旨在建立人肺腺癌细胞系,探讨其生物学特性,为进一步明确肺癌的发生机理,提供一个技术平台。方法取人肺腺癌新鲜手术肿瘤标本,经组织块体外培养并克隆建系,命名为Ch-Huang-1。采用光镜、细胞生长曲线、染色体核型分析、克隆形成率及免疫缺陷小鼠成瘤实验对细胞系生物学特性进行分析。结果细胞系及移植瘤标本证实具有腺癌恶性细胞特征。生长曲线呈S型,细胞群体倍增时间为36 h。分裂指数曲线为倒V字型,培养第30小时处于分裂期的细胞最多。克隆形成率为0.803%±0.078%。观察到肿瘤细胞染色体数目为亚三倍体,有明显的染色体异常。裸鼠皮下异种移植形成移植瘤。结论根据细胞系特征显示该细胞系是一新建的肺腺癌细胞系。
九连山金斑喙凤蝶野外生物学特性观测
[目的]通过连续12a对金斑喙凤蝶的野外调查观察,研究成虫活动规律,并利用仿生态养殖,观察金斑喙凤蝶卵和幼虫的形态特征与生活习性,研究其生物学特性,以期为金斑喙凤蝶研究与保护提供有效数据。[方法]根据2004-2012年对金斑喙凤蝶成虫活动规律的观察研究,2013-2015年,在金斑喙凤蝶成虫活动期,采用样线踏查的方法,白海拔450m往山顶海拔1200m搜索,调查视野内木兰科植物分布情况,寻找卵和幼虫,收集后带回驻地进行仿生态养殖,观察其形态特征和生活习性。[结果]金斑喙凤蝶在九连山为一年二代,以蛹越冬,第一代成虫发生期为4月上旬至5月中旬,第二代成虫发生期为8月下旬至9月中旬;2013年在木兰科植物金叶含笑上发现卵和幼虫,2014和2015年在深山含笑上发现卵和幼虫,深山含笑为新发现寄主植物,目前除九连山外尚未有报道;幼虫5龄,各龄级幼虫差异较大;预蛹成蛹经历两次蜕皮过程,这是金斑喙凤蝶研究中的一项重大发现。[结论]1)金斑喙凤蝶卵和幼虫的分布与寄主植物分布密切相关,且对生境质量有较高要求,成虫活动范围主要在寄主植物分布范围及其周边;2)金斑喙凤蝶选择生长良好的金叶含笑和深山含笑叶片上产卵,或嗜食深山含笑;3)温度、湿度等环境因子对卵的孵化、幼虫的生长发育以及化蛹和羽化影响较大;4)金斑喙凤蝶雌蝶少,卵孵化率低,幼虫发育历期长,幼虫成活率低,化蛹和羽化率低等是导致其种群数量稀少的主要原因。5)据查,目前尚未有其它蝶类化蛹过程中经历两次蜕皮的报道,预蛹化蛹蜕两次皮是金斑喙凤蝶异于其他蝶类的特殊现象。
油茶织蛾生物学特性研究
油茶(Camellia oleifera Abel.)又叫茶子树,是我国特有的油料树种,与油橄榄(Olea europaea L.)、椰子(Cocos nucifera L.)、油棕(Elaeis guineensis Jacq.)并称为世界四大木本油料植物。山茶油不饱和脂肪酸含量达90%以上,被誉为“东方橄榄油”,
环茸毒蛾生物学特性初报
油茶(Camellia oleifera Abel.)为我国特有的重要油料树种。茶油不饱和脂肪酸含量达90%以上,还含有丰富的维生素E、维生素D、维生素K和β-胡萝卜素,具有极高的营养价值和保健功能[1-2]。随着油茶经济地位的提升,
马尾松花粉仓贮害虫印度谷螟的生物学特性
研究了马尾松花粉重要仓贮害虫印度谷螟的生物学特性。结果表明,印度谷螟在浙江省富阳市1年发生5代,以成熟幼虫散居包装箱、家具、室内墙角等缝隙和纸张等堆积物间越冬。成虫、幼虫行动极其敏捷,能迅速从存贮被害物的器物空隙中溜飞、爬离,扩散蔓延能力较强。越冬代成虫羽化呈现次高峰期、主高峰期两个高峰期,分别为5月12—13日和22—23日。第1、2、3和4代成虫的羽化高峰期分别为7月3—4日、7月28—29日、8月27—29日和10月5—6日。雌、雄成虫平均交配时间为75.8 min·次-1。交配当天,雌成虫即可产卵,每头雌成虫平均产卵量为128粒。成虫平均寿命8.0天,雌雄性比为1.0︰1.2。卵平均历期为4.9天。成熟幼虫平均爬行速度为25.2 cm·min-1,直线型爬行占总虫数的62.5%。每头幼虫平均取食花粉片的质量为0.055 g。幼虫食物缺乏或成熟时,迁移寻觅新食源或隐蔽场所化蛹。蛹平均历期为9.9天。
落叶松人工林重要害虫天敌——大腹圆蛛生物学特性及其对害虫控制作用的研究
大腹圆蛛(Araneus ventricosus)在吉林省2年完成1代,跨3个年度,以1 2龄和6 7龄若蛛越冬。该蛛除卵期及1、2龄蛛外,其它龄态的若、成蛛均张网捕食生活。该蛛喜居有光的栖境,在林缘、林窗处、路旁处结圆形垂直网,昼伏夜出,在小雨条件下可以正常活动。大腹圆蛛对小型猎物可直接取食,对中、大型猎物,需缠绕成束的捕获丝缚住再取食。在林间大腹圆蛛可取食多种蛾和叶蜂成虫,包括兴安落叶松鞘蛾、落叶松毛虫、黄褐幕枯叶蛾、舞毒蛾、栎毒蛾、松皮小卷蛾、松廮小卷蛾、伊藤厚丝叶蜂和落叶松叶蜂等多种落叶松害虫,是一种有效的害虫天敌。
竹材主要变色菌霉菌的生长特性研究
从我国云南、广州、北京、湖南和安徽等省市采集变色霉变竹材标本,分离纯化得到78株真菌菌株,鉴定为木霉(Trichoderma spp.)、毛霉(Rhizomucor spp.)、曲霉(Aspergillus spp.)、镰刀菌(Fusarium spp.)、链格孢菌(Alternaria spp.)、可可毛色二孢菌(Botryosphaeria rhodina)和稻球黑孢(Nigrospora oryzae)等。选取代表性的菌株进行了生物学特性的研究。营养因子对菌株生长的影响研究表明:碳素营养和氮素营养均影响菌丝的生长及色素形成;温度条件对菌株的生长影响较大,对于大多数菌株而言,28℃是最适生长温度,5℃生长减缓甚至停滞,但未死亡,40℃以上菌株的生长受到抑制甚至死亡,但个别霉菌在50℃仍可生长,表明竹材霉菌对极端环境有一定的适应能力;竹材霉菌变色菌对酸碱度的适应范围较广,pH值在4-11下皆能正常生长,最适pH值在5-8间;光照对菌株生长的影响不大。
非小细胞肺癌神经内分泌分化与其生物学特性及预后关系的研究
背景与目的近年来研究发现非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)具有神经内分泌(neu-roendocrine,NE)分化的特性。本研究旨在探讨NSCLC的神经内分泌分化情况及其生物学行为和预后的相关性。方法随机收集2005年1月-2007年12月、随访资料满3年的206例NSCLC术后患者的病例及石蜡标本,所有患者术前均未经放化疗。石蜡标本采用EnVision免疫组化二步法检测NSCLC神经内分泌标记物神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、嗜铬素A(chromogranin A,CgA)及突触素(synaptophysin,Syn)的表达。所有数据均采用SPSS统计软件进行处理,同时采用Kaplan-Meier曲线描述生存率,并行Log-rank检验。结果所有NSCLC病例中,82例伴有神经内分泌分化,阳性率为39.8%。CgA、NSE及Syn的阳性率分别为53例(25.7%)、104例(50.5%)和91例(44.2%)。统计学分析表明,非小细胞肺癌伴NE分化与癌细胞的分化程度相关,且Syn的阳性表达与癌细胞的分化程度及淋巴结转移情况相关。单因素生存分析结果经Log-rank检验示:Syn的阳性表达与患者术后生存率有关,而NE分化与患者术后生存率无明显相关性。结论 NSCLC是否伴有NE分化是判断其生物学行为的重要指标,而Syn可作为NSCLC伴NE分化的诊断标志物,Syn阳性表达提示患者预后不良。