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Heliococcus bohemicus Sulc is very frequently found in vineyards in Northern Italy, where grapevine leafroll is widespread. Grapevine leafroll-associated virus 1 (GLRaV-1) and Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3) are also quite frequently observed, often in association with Grapevine virus A (GVA). The capacity of the mealybug to transmit these viruses to grapevine was therefore evaluated. Virus-free insects were fed on infected vines and then transferred to healthy test-plants. GLRaV-3 was transmitted to two out of 77 test-plants and GVA to one out of 38; GLRaV-1 was not transmitted. This is the first report of GVA transmission by H. bohemicus and the first report of the capacity of this mealybug to transmit GLRaV-3 to grapevine in Italy [Heliococcus bohemicus Sulc. si ritrova frequentemente nei vigneti in Italia Settentrionale, dove è diffuso l'accartocciamento della vite. Il Virus 1 associato all'accartocciamento della vite (GLRaV-1) e il Virus 3 associato all'accartocciamento della vite (GLRaV-3) sono pure osservati di frequente, spesso in associazione con il Virus A della vite (GVA). E' stata perciò valutata la capacità della cocciniglia di trasmettere questi virus alla vite. Insetti esenti da virus sono stati alimentati su piante infette e poi trasferiti su piante test sane. GLRaV-3 è stato trasmesso a due di 77 piante test e GVA a una di 38; GLRaV-1 non veniva trasmesso. Questa è la prima segnalazione della trasmissione di GVA da parte di H. bohemicus e la prima segnalazione della capacità di questa cocciniglia di trasmettere GLRaV-3 alla vite in Italia.]

A rain simulator was developed to study the effects of rain on biological and epidemiological aspects (distribution, epiphytic survival) of Pseudomonas syringae pv. tomato populations in the tomato canopy. Two different kinds of rain were simulated. Rain events, relative humidity, drip-irrigation and temperature were automatically controlled and monitored in a growth chamber. Simulated rainfall intensity varied with nozzle size, water pressure at the nozzle and height of the nozzle above the plot surface. Spray nozzles formed drops of 1.6 mm or 2.7 mm in diameter. Rain was simulated on tomato plants already colonized by P. s. pv. tomato (plants with speck symptoms where bacteria were inoculated 5 days before the rain event) and on plants not colonized by the pathogen (inoculated 3 h before the rain event). After each rain simulation, the horizontal and vertical distribution and epiphytic survival of P. s. pv. tomato were observed, for two weeks. Drops 2.7 mm in diameter were more effective in distributing bacteria over short distances and drops 1.6 mm in diameter more effective in long-distance distribution. Higher rain intensity reduced epiphytic survival of P. s. pv. tomato when the host-pathogen relation was precarious (non-colonized tomato plants), but, when the pathogen was already established (colonized plants), higher rain intensity increased bacterial growth [E' stato sviluppato un simulatore di pioggia per studiare gli effetti della precipitazione piovosa sugli aspetti biologici ed epidemiologici (distribuzione, sopravvivenza epifitica) di popolazioni di Pseudomonas syringae pv. tomato nella vegetazione del pomodoro. Sono stati simulati due tipi di pioggia. Gli eventi piovosi, l'umidità relativa, l'irrigazione a goccia e la temperatura erano regolati e controllati automaticamente in una cella climatica. L'intensità della precipitazione simulata variava in funzione della dimensione degli ugelli, della pressione dell'acqua a livello degli stessi e dell'altezza degli ugelli rispetto alla superficie di coltivazione. Gli ugelli formavano gocce di 1,6 e 2,7 mm di diametro. La pioggia è stata simulata su piante di pomodoro già colonizzate da P. s. pv. tomato (piante con sintomi di maculatura batterica, dove i batteri erano stati inoculati 5 giorni prima dell'evento piovoso) e su piante non colonizzate dal patogeno (inoculate 3 ore prima dell'evento piovoso). Dopo ogni simulazione di pioggia, sono state osservate, per 2 settimane, la distribuzione orizzontale e verticale e la sopravvivenza epifitica di P. s. pv. tomato. Le gocce di 2,7 mm di diametro erano più efficaci nel distribuire i batteri su distanze brevi, mentre quelle da 1,6 mm erano più efficaci nella distribuzione a lunga distanza. L'intensità più elevata della pioggia riduceva la sopravvivenza epifitica di P. s. pv. tomato quando la relazione ospite-patogeno era precaria (piante di pomodoro non colonizzate), ma, quando il patogeno era già insediato (piante colonizzate), l'intensità maggiore della pioggia aumentava la crescita batterica.]

Rice yellow mottle virus (RYMV) is a widespread and damaging rice pathogen in Africa. The presence, infectivity and transmissibility of RYMV in seeds of six wild host species were investigated. In serological analyses by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), each of four RYMV isolates used was detected in individual seeds of wild rice species (Oryza barthii and O. longistaminata) and the standard susceptible rice BG 90-2 (O. sativa). Virus detection in seeds of other host species (Dactyloctenium aegyptium, Eragrostis ciliaris, E. tenella and E. tremula) was unsuccessful in single seeds, but positive reactions were obtained for extracts made from several seeds. RYMV was infectious in freshly-harvested seed extracts whatever the plant species or the virus isolate. However, most infectivity was lost in dried seeds, possibly due to virus inactivation following dehydration of the seeds. Despite the presence of RYMV in dry seeds, no evidence was obtained for transmission of the virus through seeds of rice or wild host species, whatever the plant species-virus isolate combination. RYMV is unlikely to be transmitted through seeds of its host species and, therefore, virus dissemination or epidemics of rice yellow mottle do not originate from infected seeds [Il virus della maculatura gialla del riso (RYMV) è un patogeno diffuso e dannoso in Africa. Sono state studiate la presenza, l'infettività e la trasmissibilità di RYMV nei semi di sei specie ospiti spontanee. In analisi sierologiche mediante ELISA, ognuno degli isolati di RYMV utilizzati è stato riscontrato in semi individuali di specie selvatiche di riso (Oryza barthii e O. longistaminata) e nel riso suscettibile standard BG 90.2 (O. sativa). La rilevazione del virus in semi di altre specie ospiti (Dactyloctenium aegyptium, Eragrostis ciliaris, E. tenella e E. tremula) non ha dato esito positivo nei semi singoli, ma sono state ottenute reazioni positive per estratti di numerosi semi. RMYV era infettivo negli estratti di seme appena raccolti, indipendentemente dalla specie di pianta o dall'isolato del virus. Tuttavia, la maggior parte dell'infettività veniva perduta nei semi essiccati, possibilmente per l'inattivazione del virus a seguito della disidratazione dei semi. Nonostante la presenza di RYMV nei semi secchi, la trasmissione del virus fra semi di riso o specie ospiti spontanee non è stata provata, in tutte le combinazioni specie-isolato del virus. E' improbabile che RYMV sia trasmesso da semi delle sue specie ospiti e, perciò, la diffusione o l'epidemia di maculatura gialla del riso non si origina da semi infetti.]

Real-time PCR provides a fast, reliable, and cost-effective method for detecting the presence or absence of Petri disease fungi in grapevines. The primer pairs, Pmo1f + Pmo2r and Pac1f + Pac2r, were designed for species and genus-specific amplification of Phaeomoniella chlamydospora and Phaeoacremonium spp. respectively, using real-time PCR with SYBR Green. The primers were specific and showed no primer-primer dimers until after 35 cycles. Pa. chlamydospora was detected in roots, shoots and young trunks of drill-inoculated grapevines. Phaeoacremonium was detected in trunk cross-sections of naturally infected grapevines from which Phaeoacremonium aleophilum had been isolated. The protocol presented here can be adopted to provide a reliable detection system for research and industry [La real-time PCR fornisce un metodo rapido, attendibile e poco costoso per diagnosticare la presenza o l´assenza dei funghi agenti della malattia di Petri nella vite. Sono state predisposte paia di primer, Pmolf + Pmo2 e Pac1f + Pac2r, per l´amplificazione specifica per specie e genere di Phaeomoniella chlamydospora e Phaeoacremonium spp., rispettivamente, utilizzando la real-time PCR con SYBR Green. I primer erano specifici e non presentavano dimeri primer-primer fino a oltre 35 cicli. Pa. chlamydospora è stata identificata nelle radici, nei germogli e nei giovani tralci di piante inoculate mediante trapano. Phaeoacremonium è stato identificato in sezioni trasversali di tralci di viti naturalmente infette da cui era stato isolato Phaeoacremonium aleophilum. Il protocollo descritto può essere adottato per fornire un sistema diagnostico utile a livello di ricerca e di attività produttiva.]

The bacteria were isolated from the spots of pepper plants, surveyed in open-field during 1996-2001 in Macedonia. Symptoms similar to natural symptoms were reproduced following inoculation on pepper leaves. The strains were negative for amylolytic activity and ability to utilize cis-aconitate, belong to type A of Xanthomonas axonopodis pv. vesicatoria and were identified as race P0 and race P2. All strains were sensitive to copper sulphate and streptomycin sulphate and were homogeneous according to their Polymerase Chain Reaction (PCR). Polyclonal antibodies produced clear positive reaction in I-ELISA with all strains from Macedonia and reference strains from abroad [I batteri sono stati isolati da macchie presenti su piante di peperone, osservate in pieno campo dal 1996 al 2001 in Macedonia. Sintomi uguali a quelli naturali sono stati riprodotti a seguito di inoculazione in foglie di peperone. I ceppi erano negativi per l'attività amilolitica e la capacità di utilizzare l'acido cis-aconitico, appartengono al tipo A di Xanthomonas axonopodis pv. vesicatoria e sono stati identificati come razza P0 e razza P2. Tutti i ceppi erano sensibili al solfato di rame e al solfato di streptomicina ed erano omogenei, come risultato dalla PCR eseguita sugli stessi. Anticorpi policlonali producevano una reazione positiva netta in I-ELISA con tutti i ceppi macedoni e con ceppi di riferimento di altra provenienza.]

To carry out reverse genetics experiments with Pelargonium flower break virus (PFBV), one of the most important viruses affecting Pelargonium spp., cDNA clones were constructed from which RNA transcripts can be synthesized in vitro. Two populations of overlapping RT-PCR products encompassing the complete PFBV RNA were ligated into pUC18 with the T7 RNA polymerase promoter fused to the 5' extremity of the viral cDNA. The RNA transcripts derived from one of the resulting clones were infectious when mechanically inoculated to the experimental host Chenopodium quinoa and to the natural host P. zonale inducing local and systemic infections, respectively. The sequence of the infectious cDNA was almost 98% identical to that determined previously for a Spanish isolate of PFBV. This is the first description of a biologically active PFBV cDNA clone, an essential tool for detailed analyses of the viral genome [Per effettuare esperimenti di genetica inversa con il Virus della decolorazione del fiore del pelargonio (PFBV), uno dei virus più importanti che attaccano Pelargonium spp., sono stati costruiti cloni di cDNA dai quali possono essere sintetizzati in vitro trascritti di RNA. Due popolazioni di prodotti coincidenti della RT-PCR che comprendevano l'RNA completo del PFVB sono state legate nel pUC18 con il promotore T7 della RNA polimerasi fuso all'estremità 5' del cDNA virale. I trascritti di RNA derivati da uno dei cloni risultanti erano infettivi a seguito di inoculazione meccanica nell'ospite sperimentale Chenopodium quinoa e nell'ospite naturale Pelargonium zonale, inducendo infezioni rispettivamente locali e sistemiche. La sequenza del cDNA infettivo era per quasi il 98% identica a quella determinata precedentemente nel caso di un isolato spagnolo di PFBV. Questa è la prima descrizione di un clone di cDNA del PFBV biologicamente attivo, uno strumento essenziale per analisi dettagliate del genoma virale.]

Nine oleander accessions were evaluated for resistance to Pseudomonas savastanoi pv. nerii, causal agent of the oleander knot disease. None of the accessions was resistant when tested with three bacterial strains of different virulence, but the severity of symptoms induced by these strains varied significantly. The most susceptible accession Dark Salmon (dark salmon flower) showed deformation of stems, leaves and seed pods and secondary knots on aerial parts, whereas the least susceptible one White (white flower), inoculated with the least virulent strain, showed neither localized knots at the inoculation point nor secondary symptoms. In this study an in vitro test, based on prick inoculation of leaf segments, was optimised for use in pathogenicity tests or as an in vitro resistance screening test [E' stata valutata la resistenza di nove accessioni di oleandro a Pseudomonas savastanoi pv. nerii, agente causale della rogna. Nessuna delle accessioni si è dimostrata resistente nel caso di test effettuati con tre ceppi batterici caratterizzati da virulenza diversa, ma la gravità dei sintomi indotti da questi ceppi variava significativamente. L'accessione più suscettibile Dark Salmon (fiori salmone scuro) presentava deformazione dei fusti, delle foglie e dei frutti e tubercoli secondari sulle parti aeree, mentre la meno suscettibile White (fiori bianchi), inoculata con il ceppo meno virulento, non presentava tubercoli localizzati al punto di inoculazione, né sintomi secondari. In questo studio è stato ottimizzato un test in vitro, basato sull'inoculazione mediante puntura di segmenti di foglia, per l'impiego in prove di patogenicità o di valutazione della resistenza in vitro.]

Effects of the fungicide tebuconazole, applied as a leaf spray after inoculation of wheat leaves with stripe rust, were examined by means of electron microscopy and immunogold labelling. Tebuconazole strongly inhibited the development of Puccinia striiformis in host leaf tissues and also markedly altered the structures of the hyphae and haustoria. These changes included increased vacuolation, irregular thickening of cell walls, necrosis or degeneration of cytoplasm and collapse of the hyphae and haustoria. Large differences were detected in P. striiformis-infected wheat leaves treated with fungicide compared with the untreated control. A very thick layer of wall appositions and large encasements were usually formed in the infected fungicide-treated leaves, whereas such structures were never observed in the infected wheat leaves without fungicide treatment. In addition, chitinase, beta-1,3-glucanase and lignin were detected in wheat leaf tissues by immunogold labelling. Accumulation of the two enzymes and lignin increased slightly in infected leaves compared with uninoculated healthy leaves, while a much higher accumulation of the two enzymes and lignin was detected in infected wheat leaves after fungicide treatment. Our results suggest that tebuconazole not only inhibited development of P. striiformis in wheat leaves, but also enhanced structural and biochemical host defense reactions in the infected host [Sono stati esaminati gli effetti del fungicida tebuconazolo, somministrato tramite irrorazione dopo l'inoculazione di foglie di frumento con ruggine striata, mediante microscopia elettronica e immuno-oro marcatura. Il tebuconazolo inibiva fortemente lo sviluppo di Puccinia striiformis nei tessuti fogliari dell'ospite e alterava pure marcatamente la struttura delle ife e degli austori. Questi cambiamenti consistevano in vacuolizzazione, ispessimento irregolare delle pareti cellulari, necrosi o degenerazione del citoplasma e collassamento delle ife e degli austori. Sono state notate differenze notevoli nelle foglie di frumento infettate da P. striiformis trattate con il fungicida rispetto al controllo non trattato. Nelle foglie infette trattate con il fungicida si formava di norma uno strato molto spesso di apposizioni e ampi rivestimenti, mentre tali strutture non sono state osservate nelle foglie infette non trattate con il fungicida. Inoltre, mediante immuno-oro marcatura, nei tessuti fogliari del frumento sono state identificate chitinasi, beta-1,3-glucanasi e lignina. L'accumulo dei due enzimi e di lignina aumentava leggermente nelle foglie infettate rispetto a quelle sane non inoculate, mentre è stato riscontrato un accumulo molto più elevato dei due enzimi e di lignina nelle foglie infettate dopo il trattamento con il fungicida. I nostri risultati fanno ritenere che il tebuconazolo non solo inibisse lo sviluppo di P. striiformis nelle foglie di frumento, ma potenziasse le reazioni di difesa dell'ospite in caso in infezione.]

The chemical composition of the culture filtrates of Ceratocystis fimbriata f. sp. platani was investigated. Ten compounds potentially toxic to Platanus acerifolia were isolated and identified. These metabolites were mainly isocoumarins and naphthalenones. Three of these induced extensive necroses on plane tree tissues [E' stata studiata la composizione chimica dei filtrati di coltura di Ceratocystis fimbriata f. sp. platani. Sono stati isolati e identificati dieci composti potenzialmente tossici per Platanus acerifolia. Questi metaboliti erano principalmente isocumarine e naftalenoni. Tre di questi inducevano necrosi estese nei tessuti del platano]

Loose smut of barley, caused by Ustilago nuda (Jens.) Rostr., is commonly controlled through the use of systemic seed-treatment fungicides. The most widely used active ingredient in these fungicides has been carboxin. However, isolates of U. nuda resistant to carboxin have been reported in France. In 1996 and 1997, unsatisfactory levels of loose smut of barley were observed near Perugia (Central Italy), despite the treatment of the barley seed with a carboxin-based fungicide. An isolate of U. nuda (97-255) was collected from this field to determine if the pathogen had developed resistance to carboxin. Germination tests on carboxin-amended agar media indicated that isolate 97-255 was more resistant to carboxin than a wild type isolate of U. nuda collected in Canada. In tests in which isolate 97-255 was inoculated onto barley cv Regal, the percentage of smutted plants arising from the inoculated seed was not reduced by a carboxin seed treatment. This is the first report of resistance to carboxin in populations of U. nuda from Italy [Il carbone nudo dell'orzo, causato da Ustilago nuda (Jens.) Rostr., è controllato di norma tramite l'impiego di fungicidi sistemici utilizzati per la concia dei semi. Il principio attivo maggiormente utilizzato in questi fungicidi è stato la carbossina. Tuttavia, in Francia sono stati segnalati isolati di U. nuda resistenti alla carbossina. Nel 1996 e 1997, nei pressi di Perugia (Italia Centrale), sono stati osservati livelli di carbone nudo dell'orzo insoddisfacenti, nonostante il trattamento delle sementi con fungicidi a base di carbossina. Da questa coltivazione è stato prelevato un isolato di U. nuda (97-255) per determinare se il patogeno aveva sviluppato resistenza alla carbossina. I test di germinazione su substrato agarizzato addizionato con carbossina hanno indicato che l'isolato 97-255 era più resistente alla carbossina rispetto a un isolato di tipo spontaneo di U. nuda raccolto in Canada. In test in cui l'isolato 97-255 era inoculato su orzo cv Regal, la percentuale di piante affette da carbone derivanti dalla semente inoculata non è risultata ridotta dal trattamento con carbossina sui semi. Questa è la prima segnalazione della resistenza alla carbossina in popolazioni di U. nuda in Italia.]