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"大鼠"
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SD、E3与DA1U大鼠视网膜光损伤敏感性的差异研究
目的比较SD、E3与DA1U大鼠视网膜光损伤敏感性,为构建不同品系大鼠视网膜光损伤模型和研究眼底色素抗光损伤保护视网膜的相关机制研究提供实验依据。方法成年SD、E3、DA1U大鼠,雌雄随机选取,采用视网膜电图与HE染色分别检测正常情况下与光损伤后不同品系大鼠视网膜感光功能与组织形态变化,采用TUNEL染色观察光损伤后视网膜凋亡细胞的分布与数量。结果正常状态下,SD大鼠色素上皮层、脉络膜层及E3大鼠色素上皮层均无色素分布,而E3大鼠脉络膜层、DA1U大鼠色素上皮层与脉络膜层有褐色色素分布;HE结果显示,在正常状态下,3种品系大鼠视网膜外核层厚度没有显著差异,而在光损伤条件下,SD大鼠视网膜各层细胞均严重受损;视网膜电图结果显示,在正常状态下,不同品系大鼠间视网膜电图视杆细胞反应b波振幅存在显著差异,E3大鼠最大混合反应a波及b波振幅与SD大鼠相比有显著差异,而在光损伤条件下,与SD大鼠相比,E3和DA1U大鼠视网膜电图a波与b波的波幅降幅显著减弱;TUNEL染色结果显示,与SD大鼠相比,E3与DA1U大鼠视网膜内核层及外核层凋亡细胞分布范围与数量均显著下降。结论 SD、E3与DA1U大鼠间存在视网膜色素分布与光...
Journal Article
成年大鼠窦房结活细胞分离方法的建立及钠通道各亚型表达的观察
by
倪雅娟 白鸿远 张京文 杨国栋 马爱群
in
窦房结细胞
2017
目的建立急性分离成年大鼠窦房结细胞的方法,了解其形态结构特点,系统观察钠通道各亚型在窦房结细胞的表达情况,为进一步研究钠通道在窦房结功能中的作用及分子机制提供依据。方法取成年大鼠窦房结组织,Ⅱ型胶原蛋白酶联合蛋白酶酶解分离活性窦房结细胞,行钠通道亚型Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3、Nav1.5、Nav1.6、Nav1.7、Nav1.8、Nav1.9的免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察各亚型在窦房结细胞的表达。结果在急性分离的窦房结细胞中观察到梭形、弧形、细长弯曲形等细胞形态,以梭形为主,细胞横纹清楚、活性好,可存活6~8h;钠通道Nav1.1、Nav1.5、Nav1.6、Nav1.7、Nav1.8、Nav1.9在大鼠窦房结细胞呈阳性表达,Nav1.2、Nav1.3表达呈阴性。结论Ⅱ型胶原蛋白酶联合蛋白酶酶解分离方法是可靠的成年大鼠活性窦房结细胞分离方法,钠通道各亚型在成年大鼠窦房结细胞呈差异性表达。
Journal Article
CaMKII反义寡核苷酸对阿尔茨海默病样大鼠海马细胞损伤的保护作用及其机制
2017
摘要:目的研究CaMKII反义寡核苷酸对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)样大鼠海马细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用Af31—40和AlCl3双干预法建立AD样大鼠模型;造模成功的大鼠随机分为AD模型组(AD)、溶剂对照组(TE)、反义寡核苷酸组(AS)和错义寡核苷酸组(MS);以Morris水迷宫观察大鼠逃避潜伏期,用TUNEL染色检测大鼠海马细胞损伤情况;免疫印迹法检测CaMKII、NR1和NR2B在大鼠海马的表达变化。结杲AS组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期显著缩短,海马细胞损伤明显减轻,海马CaMKII、NR1和NR2B的表达显著减少;与AD组、TE组或MS组相比,差异均具有统计学意义(P〈0.05)。结论CaMKII反义寡核苷酸能够通过改善AD样大鼠学习记忆能力和减轻AD样大鼠海马细胞损伤而发挥神经保护作用,且这种神经保护作用与其降低CaMKII、NR1和NR2B的病理性高表达有关。
Journal Article
蛛网膜下腔出血大鼠海马区A-β蛋白表达与认知功能障碍的关联研究
2018
目的 研究蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)后海马区A-β蛋白表达增加对大鼠学习及记忆功能的影响。方法 将48只SD大鼠随机分为模型组和假手术组,每组24只。采用Bederson法建立SAH模型,分别于造模后第3、7、14、28天时采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习及记忆功能,并用免疫组化法检测海马区A-β蛋白的表达。结果 造模后相应时间点,模型组比假手术组逃避潜伏期时间明显延长(P〈0.05 );模型组与假手术组在3d时A-β蛋白表达无明显差异(P〉0.05),在7、14、28d时,A-β阳性细胞计数明显增加(P〈0.05)。结论 大鼠SAH后出现学习记忆功能减退及A-β蛋白表达增加,可能促使认知功能障碍的发生。
Journal Article
高盐干预对盐敏感高血压大鼠心脏microRNA133a表达及纤维化的影响
2016
目的观察高盐摄入对Dahl盐敏感大鼠及SD大鼠的血压、左室质量、心肌microRNA133a以及纤维化水平的影响,探讨microRNA133a在高盐干预的盐敏感性高血压心肌纤维化中的作用。方法以Dahl盐敏感大鼠及SD大鼠为动物模型,给予高盐饮食喂养4周,并设置低盐对照组。用tail-cuff法监测各组大鼠血压变化、并检测左室质量指数(LVWI)、左心室心肌组织胶原蛋白I(CollagenⅠ)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)及microRNA133a的表达量。结果高盐组大鼠的血压均比干预前升高,与SD大鼠相比,Dahl盐敏感大鼠高盐组较低盐组血压升高幅度更为显著(P〈0.01)。Dahl盐敏感大鼠高盐组LVWI、CollagenⅠ与CTGF表达量均较低盐组明显增加(P〈0.01),而SD大鼠两组间无明显差异(P〉0.05)。各高盐组microRNA133a表达量均比低盐组下调(P〈0.01),Dahl盐敏感大鼠高盐组microRNA133a表达量较SD大鼠高盐组下降更为显著(P〈0.05)。结论高盐可能通过下调心肌microRNA133a的表达参与盐敏感性高血压心肌纤维化。
Journal Article
水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响及IL-6和NF-κB的表达变化
2017
目的探索不同浓度水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用及对IL-6和NF-κB表达的影响。方法将40只成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注模型组(IR组)、低剂量药物组(L组)、高剂量药物组(H组)。采用全自动生化分析仪检测血清肌酐及尿素氮浓度,ELISA检测肾组织细胞白介素-6(interleukin-6,IL-6)及细胞核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)浓度,HE染色检测肾脏病理损伤程度,免疫组化检测肾脏IL-6及NF-κBp65的表达。结果 IR组血清肌酐、尿素氮浓度、胞核NF-κB、胞质IL-6表达均较S组明显升高(P〈0.05),L组、H组较IR组血清肌酐、尿素氮浓度及胞核NF-κB、胞质IL-6表达降低(P〈0.05),并随着药物剂量增加进一步降低(P〈0.05);IR组较S组肾小管损伤重,L组及H组肾小管损伤程度较IR组明显减轻,并随着给予浓度的增加而损伤程度进一步减轻。结论水飞蓟素可以减轻大鼠IRI,能够抑制细胞质IL-6、细胞核NF-κB表达,并随着给药浓度的增加作用逐渐增强。
Journal Article
麝香对颅骨骨缺损模型大鼠FGF-2和EGF mRNA表达的影响
2017
目的探讨麝香对颅骨骨缺损模型大鼠成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor,FGF-2)和表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)表达的影响。方法 300只SD大鼠(雌、雄各150只)通过牙科钻建立颅骨骨缺损模型,模型动物采用完全随机方法分为模型组和给药组(每组150只),两组再按照给药时间各分为7、14、28d3个小组,每组50只。给药组每天灌服天然麝香(4.2mg/100g),模型组每天灌服等量的生理盐水,采用实时荧光定量PCR法测定颅骨骨缺损处FGF-2mRNA和EGF mRNA的表达。结果给药组在第7天和第14天EGF mRNA表达水平均高于模型组,但均无统计学差异,第28天EGF mRNA表达水平降到最低,与模型组比较差异有统计学意义(P〈0.05);给药组在第7天FGF-2mRNA表达最高,与模型组比较差异有统计学意义(P〈0.05),第14天和第28天降低,与模型组比较无显著差异。结论麝香在不同时间段对大鼠颅骨骨缺损区的愈合有不同的影响,其机制可能与上调FGF-2mRNA表达和下调EGF mRNA表达水平有关。
Journal Article
温胆汤对帕金森病模型大鼠抑郁样行为及脑内单胺类神经递质的影响
2017
目的 观察温胆汤对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型大鼠抑郁样行为的作用,并探讨其相关机制。方法 以6-羟多巴胺损毁大鼠单侧内侧前脑束建立PD模型,用温胆汤灌胃治疗,采用蔗糖偏好和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为的改变,高效液相色谱-电化学检测法检测相关脑区单胺类神经递质含量的变化。结果 与假手术组相比,模型大鼠蔗糖消耗量显著减少,强迫游泳不动时间明显延长;内侧前额叶皮层内多巴胺、5-羟色胺和去甲肾上腺素含量显著减少,纹状体内多巴胺含量明显减少。经温胆汤灌胃治疗2周后,模型大鼠蔗糖消耗量显著增加,强迫游泳的不动时间显著缩短,内侧前额叶皮层中多巴胺、5-羟色胺和去甲肾上腺素含量明显增加。结论 温胆汤可以改善PD伴发的抑郁样行为,对内侧前额叶皮层内单胺类神经递质的调节可能是温胆汤发挥疗效的机制之一。
Journal Article
大鼠脑皮质星形胶质细胞的体外优化培养及鉴定
2015
目的旨在获得高纯度的星形胶质细胞,并对不同培养时期的细胞进行鉴定,为进一步研究奠定基础。方法常规分离新生SD大鼠大脑皮质并制备单细胞悬液,采用差速黏附加摇床震荡法对所获得的细胞进行纯化。倒置相差显微镜及HE染色观察细胞形态,GFAP免疫荧光对获得细胞进行鉴定。结果原代培养的皮质细胞从3d开始迅速增殖,9-12d即可铺满瓶底,此时细胞呈明显的分层生长,星形胶质细胞位于底层,形态多样,阳性率为(67.2±7.1)%;经过1次传代后,GFAP阳性率有所提升(84.0±6.0)%,但不能完全去除小胶质细胞及少突胶质细胞,细胞仍呈分层生长;至第3次传代后,获得大量几乎为单一种类的星形胶质细胞,其胞体较大、突起较短粗,一般2-3个,胞核圆形或椭圆形,常偏于一侧,GFAP染色呈强阳性,阳性率可达(97.6±2.4)%。结论通过差速黏附与摇床震荡相结合的方法,获得了高纯度且生长状态良好的星形胶质细胞。
Journal Article
大鼠软骨生成过程表达的小分子 RNA 生物信息学分析
2015
目的:分析大鼠软骨形成过程中小分子 RNA(sRNA)表达谱变化及其基因功能,探讨软骨细胞增殖与分化的机制。方法取新生、断乳、性成熟3个时间节点的雌性 SD 大鼠股骨头软骨构建 sRNA 文库,Solexa 测序平台鉴定软骨组织全部 sRNA 序列表达,所得的全部清洁序列与 SD 大鼠基因组信息比对,并做生物信息学分析。结果3个文库筛选出与基因组序列完全匹配序列,分别对应着217921条(41.23%)、196650条(38.74%)、245436条(41.54%)unique sRNA 序列。长度为20~24 nt 的 sRNA 占比:d 0为71.94%、d 21为72.85%、d 42为86.39%;其中,长度为22 nt的 sRNA 约占清洁序列的一半。文库序列分布特征,符合高质量 sRNA 文库的特征。超过总数62%的清洁序列来自于成熟 miRNA 序列,但在3个文库中的占比却仅仅只有0.69%、0.78%和0.63%。约60%的unique sRNA 序列无法与 miRBase 20.0和 Rfam9.1匹配。结论3个 sRNA 文库的 miRNA 这种分布模式,可能暗示着有功能不同或者来源各异的 miRNA,参与了对骨骼发育和骨形成关键阶段软骨细胞增殖与分化的调控。
Journal Article