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"干细胞"
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经血来源干细胞移植在小鼠卵巢早衰模型中的定位分布
2017
目的探讨经血来源干细胞(menstrual-derived stem cells,MenSCs)移植在卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)小鼠模型中的分布及生长情况。方法通过腹腔注射顺铂构建POF小鼠模型,90只8周龄雌性C57/BL6小鼠随机分为3组,MenSCs移植组:利用携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因的慢病毒感染MenSCs进行标记,建模后经尾静脉注射GFP标记的MenSCs悬液(5.0×107个/mL)200μL;POF组:建模后小鼠尾静脉注射等量PBS;空白对照组:正常小鼠不予任何处理仅尾静脉注射等量PBS。观察移植后各组小鼠的一般情况,移植后第10天处死小鼠测定血清FSH和E2浓度、检测卵巢组织学变化、卵泡计数以及检测GFP荧光信号在卵巢内的分布和定位情况。结果建模后小鼠与空白对照组小鼠比较体质量减轻、食欲减退、活动减少,POF组小鼠FSH水平显著增高,E2水平显著降低,卵巢间质纤维化明显,各级卵泡数均显著减少。MenSCs移植组小鼠自移植后体质量逐渐增加,食欲增强,活动增多,移植后第10天FSH浓度显著低于POF组;E2浓度显著高于POF组;原始卵泡、生长卵泡及成熟卵泡数均显著高于POF组,卵巢间质纤维化程度较POF组减轻,但各项指标仍与空白对照组间存在差异。荧光显微镜下可见GFP-MenSCs定位于卵巢间质,未见于卵泡及颗粒细胞,肝脏、肾脏、肺组织未见GFP绿色荧光信号。结论 MenSCs移植可向POF小鼠卵巢归巢,定位于卵巢间质,对卵巢组织结构及内分泌功能起到修复作用。
Journal Article
乳腺癌干细胞向血管内皮细胞分化及血管形成的实验研究
2017
目的探讨乳腺癌干细胞向血管内皮细胞分化的潜力及参与肿瘤血管形成的作用。方法收集人乳腺癌组织样本,检测肿瘤血管中突变型P53、CD31、VEGF的表达及Her-2扩增;制备乳腺癌单细胞悬液,分选出CD44^+/CD24-/low细胞,以培养体系为EGM-2内皮细胞培养基培养,检测其内皮细胞表面标志CD31和CD105的表达和摄取乙酰化低密度脂蛋白的能力,体外进行三维胶培养,观察其脉管样结构。结果乳腺癌组织样本中均可观察到CD31、VEGF、突变型P53的表达,并沿着血管腔或血管球排列;免疫荧光显示乳腺癌组织血管内表达CD31和DAPI信号;在13例所取样本中检测到Her-2阳性扩增4例,未扩增9例。分离成功的乳腺癌干细胞进行免疫磁珠分选,分选前CD44^+细胞比例[(7.5±2.6)%]明显低于分选后[(94.3±4.7)]%,差异具有统计学意义(P〈0.05);分选前CD24^+细胞比例[(48.2±9.4)%]明显高于分选后[(4.3±1.6)%],差异具有统计学意义(P〈0.05)。乳腺球细胞中CD105^+细胞比例为(4.5±0.9)%,CD31^+细胞比例为(6.2±1.3)%;经内皮细胞培养体系持续培养3代后,CD105^+和CD31^+细胞比例分别为(79.6±9.3)%和(84.1±10.7)%,差异有统计学意义(P〈0.05)。经内皮细胞培养体系培养后的细胞能吞噬DiL-Ac-LDL,内皮细胞组可见有脉管样结构形成,而对照组无脉管样改变的趋势。结论乳腺癌干细胞来源的内皮细胞可分化为血管内皮细胞并具有脉管形成的能力,提示乳腺癌干细胞可能参与肿瘤血管的形成。
Journal Article
肺上皮干/祖细胞种类和研究方法进展
2017
分离和鉴定肺上皮干/祖细胞,深入了解他们在肺脏生理病理条件下的具体作用机理,对于防治包括肺癌在内的肺脏疾病有重要意义。本综述介绍了已鉴定的肺上皮干/祖细胞种类和肺上皮干/祖细胞研究方法的最新进展,前者具有区域特异性,主要包括位近端气道的基底细胞和导管细胞,位细支气管的Clara细胞、变异Clara细胞、细支气管肺泡干细胞和诱导出的krt5~+细胞及位肺泡的II型肺泡上皮细胞和II型肺泡上皮祖细胞;后者主要包括肺损伤模型、谱系示踪技术、三维培养技术、移植、慢性标记细胞法及单细胞转录组学分析等。最后简述了肺上皮干/祖细胞与肺癌的关系以及肺癌干细胞靶向药物治疗进展。
Journal Article
圈养孟加拉虎脂肪间充质干细胞的分离培养和生物学特性
圈养孟加拉虎(Panthera tigris tigris)是保护该濒危物种的有效途径,但限制性的圈养环境导致圈养虎的健康问题日益凸显,尤其是肾炎,当前的治疗方法预后效果较差。为分离获取、鉴定并培养具有治疗孟加拉虎肾炎治疗潜力的孟加拉虎脂肪间充质干细胞,通过采集孟加拉虎的脂肪组织,利用Ⅰ型胶原酶消化法分离脂肪间充质干细胞并进行传代培养;采用CCK8法测定P3、P6和P9代细胞活性并绘制生长曲线;采用PCR法扩增间充质干细胞表面特殊标记物基因;通过成脂肪和成骨诱导分化试验分别测定脂肪间充质干细胞的成脂与成骨诱导分化能力。结果发现:孟加拉虎脂肪间充质干细胞为长梭形,折光性较好,生长情况良好;P3、P6和P9代细胞生长曲线呈典型的“S”型,符合间充质干细胞生长曲线规律;PCR扩增得到CD44、CD90、CD105和CD29特异性表面标记物基因;诱导分化试验表明,脂肪间充质干细胞具有成脂成骨诱导分化能力。综上,分离培养获得的细胞符合间充质干细胞特征,表明成功分离出孟加拉虎脂肪间充质干细胞。虎脂肪间充质干细胞的成功分离将作为一种潜在的细胞治疗手段,可能为虎肾炎的治疗提供新的选择,有望在维持虎的健康状态和延长寿命方面产生积极的临床效果。
Journal Article
子宫内膜癌干细胞分化过程中microRNA表达谱的鉴定及分析
2018
目的 筛选子宫内膜癌干细胞分化过程中差异表达的microRNAs(miRNAs)并进行初步鉴定。方法 无血清悬浮培养法富集子宫内膜癌干细胞,贴壁培养获得其分化细胞。利用microRNA芯片比较肿瘤干细胞及其分化细胞之间miRNAs的表达差异,挑选出有显著差异的miRNAs,通过RT-qPCR进行验证,应用TargetScan等数据库预测其靶基因;同时,芯片检测肿瘤干细胞及其分化细胞之间基因表达的差异,结合预测的miRNAs靶基因进行综合分析。结果 microRNA芯片筛选得到子宫内膜癌干细胞及其分化细胞之间差异表达(相差倍数2倍以上)的miRNAs有11个,其中在肿瘤干细胞中表达上调的miRNAs 10个,分别为miR-522、miR-139-3p、miR-520c-5p、miR-518d-5p、miR-146b-5p、miR-34a、miR-526a、miR-193a-3p、miR-221、miR-4674;在肿瘤干细胞中低表达的miRNA 1个,为miR-760。RT-qPCR检测结果显示,除miR-526a、miR-4674以外,其余9个miRNAs在肿瘤干细胞及分化细胞间的相对表达量均存在显著差异,与芯片检测结果一致。TargetScan、miRanda及miRTarBase在线数据库的交集中,筛选的miRNAs均可预测到靶基因。基因芯片检测肿瘤干细胞及其分化细胞,表达有显著性差异的基因共445个,其中207个在肿瘤干细胞中高表达,238个在肿瘤干细胞中低表达,与预测的miRNAs靶基因进行综合分析后发现,除miR-139-3p外,两者均有交集。结论 子宫内膜癌干细胞分化过程中部分miRNAs的表达具有显著性变化,对此进行深入探索将为肿瘤干细胞的分化机制研究提供新的线索。
Journal Article
骨髓动员与骨髓间充质干细胞移植促进极量肝切除大鼠肝再生作用的对照研究
2014
目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植与骨髓动员干细胞对极量肝切除大鼠肝功能恢复及肝再生的促进作用,探讨其在极量肝切除术后辅助治疗中的应用价值。方法建立极量肝切除(约85%)大鼠模型,随机分为4组。肝切除组(对照组,n=15):仅行极量肝切除;粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(n=15):腹腔注射rhG-CSF 150μg/(kg·d),连续5d;BMSCs组(n=15):大鼠尾静脉注射1.5ml BMSCs悬液(含1.5×106个BMSCs);G-CSF+BMSCs组(n=14):大鼠尾静脉注射1.5ml BMSCs悬液(含1.5×106个BMSCs),同时给予rhG-CSF 150μg/(kg·d)腹腔注射,连续5d。采用流式细胞仪检测G-CSF动员后大鼠外周血CD34+细胞比例;分别于术后第3、9天采血检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和白蛋白(ALB)等肝功能指标;最后一次采血后处死大鼠取肝组织,常规HE染色观察肝组织病理变化,采用免疫组织化学方法观察肝内Ki-67及BrdU阳性细胞表达情况。结果经流式细胞仪鉴定所分离细胞为BMSCs。rhGCSF骨髓动员后外周血BMSCs明显升高,5d后达高峰。对照组CD34+细胞比例为0.004%,G-CSF组骨髓动员3、5、9d后CD34+细胞比例分别为0.009%、0.016%、0.019%。3个治疗组术后第9天ALB均升高,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。3个治疗组Ki-67阳性细胞数(分别为110±28、104±34、99±22/400倍视野)及BrdU阳性细胞数(分别为18±6、16±6、17±5/400倍视野)均高于对照组(分别为73±27、12±4/400倍视野),差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 G-CSF动员自体BMSCs及同种异体大鼠BMSCs移植均有促进极量肝切除大鼠肝再生和肝功能恢复的作用,但二者联合应用未显示出协同作用。
Journal Article
成体心肌干细胞的研究进展
by
郑楠 张宁坤 高连如
2013
传统观点认为心脏是一个终末分化器官,然而随着成体心肌干细胞(CSCs)的发现,这种观点已受到广泛质疑。由于CSCs具有高度的自我更新能力和特异性心肌分化潜能,目前被认为是最有希望应用于缺血性心脏病及其他终末期心脏病替代治疗的干细胞类型。本文综述了目前关于人源CSCs、心外膜源细胞(EPDC)的研究概况,及其应用于心脏再生领域的治疗策略和研究中存在的问题。
Journal Article
间充质干细胞在多发性硬化症治疗中的应用:全球研究探索与展望
多发性硬化症是青少年群体中最常见的神经系统疾病,目前世界上约200万患者深受其困扰,但面对此类疾病依然没有有效的治疗和干预方法。即使当前针对病理性治疗的标准治疗方案,也仅能减轻多发性硬化症的临床症状,而且存在严重的副作用。因此,寻找有效且副作用小的治疗方法迫在眉睫。动物实验以及早期临床研究业已证明间充质干细胞具有潜在的神经再生和免疫调控能力,为多发性硬化症的治疗带来了更广阔的前景。
Journal Article
非灵长类动物精原干细胞及其多潜能性的研究进展
2016
精原干细胞(SSC)既具有自我更新能力又能分化成精子,是雄性动物体内唯一能将遗传信息传递给子代的成体干细胞。最新研究发现,SSC在体外特殊培养条件下能够去分化形成胚胎样多潜能干细胞,进而转分化生成3个胚层来源的细胞。上述研究主要是在非灵长类动物体内进行的。本文主要针对非灵长类动物SSC的生物学特性、分离纯化、培养、鉴定、移植等进行简要的概述,并对其多潜能性及可塑性的研究进展进行讨论,旨在探讨SSC在男性不育症治疗和人类再生医学领域的应用潜能。
Journal Article
自体骨髓干细胞联合脐血单个核细胞移植治疗胸段慢性脊髓损伤27例报告
2012
目的观察自体骨髓干细胞联合脐血单个核细胞移植治疗胸段慢性脊髓损伤的效果。方法选择接受自体骨髓干细胞联合脐血单个核细胞移植治疗的胸段慢性脊髓损伤患者27例,每位患者均接受4次干细胞悬液注射治疗,每周1次。收集患者治疗前(基线)及治疗后6周、6个月时的最低正常功能平面,ASIA残损分级,ASIA运动感觉评分,ASIA模拟视觉评分,Ashworth评分等资料并进行比较,评价治疗效果。结果治疗后6个月,6例患者左、右侧感觉最低正常功能平面出现下降(1或2个平面),s例患者两侧运动最低正常功能平面出现下降(下降1个平面2例,2个平面1例,10个平面l例,11个平面1例)。治疗后6周,ASIA残损分级由A级变为B级4例,由A级变为C级1例,由B级变为C级1例,ASIA残损分级变化率为22.2%(6/27);治疗后6个月随访时,ASIA残损分级由A级变为B级1例,ASIA分级总的变化率为25.9%(7/27)。治疗后6周、6个月tCASIA下肢运动评分分别为1.7±2.9、3.1±3.6,明显高于治疗前(0.5±1.5,P〈0.05)。治疗后6周、6个月时ASIA感觉(轻触)评分分别为68.8±14.4、70.5±14.4,ASIA感觉(针刺)评分分别为68.4±14.7、70.2±14.4,均明显高于治疗前(分别为66.6±13.7、67.0±13.6,P〈0.05)。治疗前改良Ashworth量表评分为1.8±1.5,与治疗后6周(1.6±1.2)比较无明显差异,但明显高于治疗后6个月(1.1±0.8,P〈0.05)。结论自体骨髓干细胞联合脐血单个核细胞移植能从一定程度上改善胸段慢性脊髓损伤患者ASIA残损分级和运动感觉功能,并可部分促进慢性脊髓损伤的恢复。
Journal Article