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结核分枝杆菌（结核杆菌）易侵袭中枢神经系统、呼吸系统、泌尿系统等多系统而致病,病残率和病死率较高.近年来,结核病发病率和病死率在全球许多地区出现回升现象,而且耐药性结核杆菌的出现给结核病的诊断和治疗带来了困难.因此,了解其耐药机制并制定有效的治疗方案对结核病的及时诊断、有效治疗、改善患者预后至关重要.本文对常用抗结核药物的耐药分子机制及治疗方案进行总结,以为临床提供参考.

为探讨蓖麻（Ricinus communist L.）对锰矿区土壤生态修复及能源化利用潜力，将不同品种蓖麻湘蓖1号和淄蓖7号播种在锰尾矿库土壤上，进入生殖生长阶段时采收全株，测定栽植土壤及植株根、茎、叶中5种重金属元素含量。结果显示：土壤中Mn平均含量最高达7884.96 mg＆#183;kg-1，超过国家规定的土壤环境质量域级标准6.5倍；湘蓖1号不同器官的Mn浓度从高至低为根＆gt;叶＆gt;茎，淄蓖7号不同器官Mn含量叶＆gt;茎＆gt;根，其叶中Mn平均浓度最高为765.43 mg＆#183;kg-1，较湘蓖1号叶中的平均含量高出79.53%， Pb、Cu、Cr含量及叶/根比值均大于湘蓖1号；植株体内重金属含量与土壤中重金属浓度的相关分析表明，重金属的积累量和转移量，受到土壤中几种重金属元素的共同影响。结果说明：2个品种的蓖麻均可以作为锰矿区能源化修复利用，对重金属的吸收和转运在品种间存在差异，淄蓖7号地上部分对重金属的迁移能力强于湘蓖1号。

目的筛选来源相同辐射耐受性不同的宫颈低分化鳞癌细胞DNA损伤修复相关基因的差异表达，探讨宫颈癌辐射耐受的机制。方法用9MeV-β射线反复多次间歇大剂量照射人宫颈低分化鳞癌细胞株SiHa，建立辐射耐受性细胞SiHaR，用DNA损伤修复相关PCR基因芯片检测SiHa与siHaR差异表达基因，并对筛选出的部分基因进行Western blot验证。结果SiHa及SiHaR细胞经射线照射后呈指数性杀灭，同一剂量照射后SiHaR细胞存活分数（survival fraction，SF）值更高，SiHaR细胞在2Gy照射后细胞存活分数（SF2）是SiHa的2．26倍；二者有差异表达的DNA损伤修复相关基因41个，其中上调基因27个，下调14个。有13个位点出现6倍以上或低于0．1的差异。Western blot对4个差异表达蛋白质验证结果提示，与SiHa细胞相比，糖尿病关联Ras相关基因（ras—related associat—ed with diabetes，RRADl）、复制因子C2[-replication factor C（activator1）2，RCF2]在SiHaR表达水平明显下调，而X线修复交叉互补基因1（X-ray repair complementing defective repair，XRCCl）及切除修复交叉互补基因（excision repair CROSS—complementing，ERCCl）蛋白质明显上调。结论人宫颈癌细胞系SiHa经间歇性大剂量射线多次照射后筛选获得的SiHaR细胞具有稳定的辐射耐受性；这与DNA损伤修复能力在基因水平上发生了某些突变明显相关。这为通过调控相关基因进行放射敏感性调控提供了依据。

目的研究褪黑素（MT）的镇痛作用及其与哌替啶（PD）联合使用的效果。方法将60只昆明小鼠随机平均分为对照组、MTl组（40mg／kg）、MT2组（80mg／kg）、MT3组（160mg／kg）、PD组（40mg／kg）和联合注射组（MT80mg／kg、PD40mg／kg）。每只小鼠腹腔注射1．2mL药物。30min后用VonFrey测痛法测定小鼠两后足的痛阈值。对上述对照组、MT2组、MT3组、PD组和联合注射组小鼠再连续5d给药并每天测痛，观察药物镇痛作用的耐受性。继续给药1d后，立即注射纳洛酮，观察小鼠的戒断反应。同时，每天统计小鼠排便数量，观察药物对胃肠道的影响。结果MTl、MT2、MT3组与对照组相比，褪黑素有明显镇痛作用，并呈剂量依赖性。MT2组与PD组镇痛效果差异无统计学意义（P〉0．0087），MT3组镇痛效果高于PD组（P％0．0087）。褪黑素和PD的联合使用使镇痛效果有所提高。褪黑素组和PD组小鼠均产生了耐受性，但褪黑素组小鼠耐受性小于PD组（P〈0．05）。PD组小鼠出现显著戒断反应，而褪黑素组、联合注射组及对照组小鼠未出现明显戒断反应（P〉0．05）。PD组小鼠排便数量显著高于对照组（P％0．05）。褪黑素组和联合注射组小鼠排便与对照组无显著差异。结论褪黑素镇痛作用显著，与PD有协同作用，具有一定的耐受性但不产生依赖性，并可以逆转PD的依赖性和胃肠道副作用。这为褪黑素在镇痛方面的开发研究提供了动物学实验依据。

目的 探讨五味子甲素对胶质瘤干/祖细胞耐药性的影响及作用机制.方法 自人胶质瘤细胞系SHG-44中分离培养胶质瘤干/祖细胞SHG-44s,予五味子甲素0、12.50、25.00和50.00 μmol/L联合长春新碱400、800和1200 nmol/L,细胞活性检测试剂盒CCK-8细胞毒性实验检测SHG-44s细胞增殖活性,罗丹明123染色检测SHG-44s细胞泵出药物能力,实时聚合酶链反应(PCR)和Western blotting法检测SHG-44s细胞ATP结合盒转运子B1(ABCB1)基因转录和翻译能力.结果 五味子甲素50 μmol/L即可抑制SHG-44s细胞增殖活性(P=0.001,0.001,0.039),剔除这一浓度后无论长春新碱浓度为400、800或1200 nmol/L,联合应用五味子甲素均可抑制SHG-44s细胞增殖活性(长春新碱400 nmol/L组:P=0.007,0.001;长春新碱800 nmol/L组:P=0.001,0.000;长春新碱1200 nmol/L组:P=0.000,0.000).倒置荧光显微镜观察,五味子甲素12.50 μmol/L组和25.00 μmol/L组SHG-44s细胞可见明显绿色荧光.流式细胞术显示,随着五味子甲素浓度的增加,SHG-44s细胞罗丹明123染色阳性细胞比例分别为10.40％、39.20％和45.20％.实时PCR法显示,五味子甲素12.50μmol/L组和25.00μmol/L组SHG-44s细胞ABCB1基因表达水平较0μmol/L组降低(P=0.027,0.006),尤以25.00μmol/L组显著(P=0.034).Western blotting法显示,随着五味子甲素浓度的增加,SHG-44s细胞P-糖蛋白表达水平下降.结论 五味子甲素通过抑制胶质瘤干/祖细胞表面已存在的ABCB1基因编码的P-糖蛋白泵出药物能力并降低ABCB1基因转录和翻译能力,逆转胶质瘤干/祖细胞耐药性.

目的观察高级别胶质瘤细胞系（U87、U251和LN229）γH2AX蛋白表达变化，据此判断胶质瘤对放射线的敏感程度。方法选择胶质瘤细胞系U87、U251和LN229细胞株，通过细胞克隆形成实验，检测经不同剂量（0、2、4、6、8和10Gv）x线照射后胶质瘤细胞克隆形成率，并绘制细胞存活曲线、测定放射敏感性；采用Westernblotting法检测经剂量为2Gy的X线照射后不同时间点（0min、30min、1h、2h、6h、12h、24h、36h和48h）各胶质瘤细胞系γH：AX蛋白表达变化。结果细胞克隆形成实验显示，随着X线照射剂量的增加，胶质瘤细胞存活分数逐渐降低、细胞克隆形成率减少，放射增敏比自高至低依次为U87、LN229和U251细胞（均P=0．000）。Westernblotting法显示，随着X线照射时间的延长，各胶质瘤细胞系γH2AX蛋白表达呈现先上升后下降的时间效应曲线，U87、LN229和U251细胞1H：AX蛋白表达峰值时间依次为2、1和1h（e=0．000、0．000、0．015）；γH2AX蛋白相对衰减速度（r=0．733，P=0．025）和升高程度（r=0．672，P=0．047）均与放射增敏比呈正相关。结论7H：AX蛋白有望成为检测高级别胶质瘤细胞系放射敏感性的一项预测指标。

背景与目的以表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)为靶点的分子靶向治疗在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的治疗中发挥重要的作用。EGFR突变的患者对EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)治疗敏感、疗效显著,但无论近期疗效如何,患者最终都不可避免地产生耐药。大量研究证实,EGFR基因的二次突变(T790M)是患者耐药的主要原因。本研究旨在探讨电离辐射对NSCLC细胞株T790M突变所致EGFR-TKI耐药的影响。方法选择NSCLC细胞株H1975和H3255为研究对象,实时荧光定量PCR法检测两株细胞的突变状态、克隆形成实验观察两株细胞的放射敏感性,MTT法检测各处理组两株细胞对EGFR-TKI的抗药性。结果 H1975为T790M+L858R双突变株、H3255是仅有L858R的单突变株;各处理组H1975及H3255的存活分数未见明显差异(P=0.952),提示T790M突变对NSCLC细胞株的放射敏感性无影响;2.5 Gy X线辐射组,H1975的IC50为(0.678,2±0.373)μmol/L,较0Gy对照组的(3.520±0.821)μmol/L明显下降,差异有统计学意义(P=0.008),H1975相较于H3255的抗药性也从85.9倍下降为39.2倍。结论电离辐射可降低NSCLC细胞株T790M突变所致的TKI耐药,本实验的研究结果为后续的体内和临床研究提供了研究依据;EGFR-TKI治疗期间联合放射治疗对克服T790M突变介导的耐药性有望成为一种有希望的治疗策略。

背景与目的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）是决定放疗效应的一个重要因素,其过表达或是下游通路的激活与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤的放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路可能会增强放疗敏感性。本研究旨在探讨小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼能否增加肺癌细胞株HCC827和H358的放疗敏感性及其可能的机制。方法选取HCC827和H358这两个非小细胞肺癌细胞株,分为单纯X线组和X线＋吉非替尼两组。单纯X线组采用单纯X线照射,X线＋吉非替尼组经1μmol/L吉非替尼作用24h后再行X线照射。克隆形成实验比较两株细胞中不同分组细胞放射敏感性,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后各时间点细胞核中的磷酸化H2AX（γ-H2AX）及EGFR焦点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达。结果克隆形成实验中,H358细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.355和0.433;HCC827细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.223和0.242,差别不明显。激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后各时间段实验组H358细胞核中g-H2AX斑点相比对照组要多,且持续时间更长。而对照组和实验组的HCC827细胞g-H2AX斑点在各时间段并无明显差异;激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后对照组H358的EGFR蛋白在1h内入核,而经吉非替尼处理后EGFR蛋白几乎不入核;实验组及对照组HCC827细胞的EGFR表达位置均在细胞质中,胞核中很少或者没有,可以认为并无入核现象;Western blot结果显示,H358细胞在经4Gy放射处理后有入核现象,而预先经吉非替尼处理后,EGFR蛋白几乎不在核内表达而仍位于细胞浆内。对于HCC827细胞,实验组及对照组的EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中很少或没有,且两组并无明显差异。结论吉非替尼可增加肺癌细胞株H358的放射敏感性,这可能与其阻止放疗后EGFR入核、影响放疗后双链断裂（double strand break,DSB）修复有关;而对HCC827细胞无影响,可能与其放疗后EGFR不入核相关。

目的观察热休克蛋白27相关蛋白1（HSPBAPl）和棘皮动物微管结合蛋白类似蛋白5（EML5）在耐药性癫痫患者脑脊液中的表达变化，探讨其用于耐药性癫痫早期诊断的临床价值。方法根据纳入标准共选择39例耐药性癫痫患者和性别、年龄与之相匹配的健康志愿者40例入组，经腰椎穿刺术采集脑脊液标本，双抗体夹心酶联免疫吸附法检测HSPBAPl和EML5。结果耐药性癫痫组患者脑脊液HSPBAP1和EML5表达水平分别为（0．17±0．03）和（0．13±0．02），正常对照组为（0．10±O．03）和（O．08±0．02），低于耐药性癫痫组且差异具有统计学意义（t=3．239，3．294；均P：O．002）。结论耐药性癫痫患者脑脊液HSPBAPl和EML5表达水平明显升高，可为耐药性癫痫的诊断提供新的途径，有助于耐药性癫痫的早期诊断。

目的探讨环氧合酶-2抑制药塞来昔布对慢性颞叶癫痫大鼠海马核因子-κBp65和P-糖蛋白表达的影响，以及核因子-κBp65和P-糖蛋白与颞叶癫痴发病机制的关系，以为环氧合酶-2抑制药用于抗癫痼药物辅助治疗提供实验依据。方法采用大鼠海马CA3区微量注射海人酸的方法制备颞叶癫痫动物模型，免疫组织化学染色和Westernblotting法观察塞来昔布治疗后大鼠海马核因子-κBp65和P-糖蛋白表达变化。结果与对照组相比较，颞叶癫痫大鼠海马核因子-κBp65、P-糖蛋白表达水平，以及核因子-κBp65核移位现象明显增加（均P〈0．05）；经塞来昔布治疗后，海马组织中核因子-κBp65、P-糖蛋白表达水平及核因子-κBp65核移位现象显著改善，与模型组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论核因子-κBp65和P-糖蛋白在颞叶癫痼慢性期表达上调、核因子-κBp65核移位现象增加，有可能是难治性癫痫发生与发展的分子生物学机制之一。环氧合酶-2抑制药塞来昔布通过降低慢性颞叶癫痫大鼠海马CA3区核因子。KBp65和P-糖蛋白表达水平，抑制核因子-κBp65核移位，最终降低炎性反应，逆转多药耐药而发挥抗癫癫作用。