Explore the vast range of titles available.

为了解环境温度对东北林蛙（Rana dybowskii）和黑龙江林蛙（R.amurensis）体温调节能力的影响，研究了2种林蛙在不同时间（07：00、10：00、13：00、16：00、19：00）、室温及梯度变温（10、12、14、16、18、20 ℃）等条件时的体温变化规律。结果表明：2种林蛙体温调节均无显著的性别差异，林蛙体温与环境温度的变化趋势一致。环境温度最高时，2种林蛙的体温也达到最高，体温与环境温度显著正相关；体温的变化幅度、回归方程的斜率和等温点3个参数可以作为判断体温调节能力的重要指标。东北林蛙的体温日变化幅度大于黑龙江林蛙。体温与环境温度的线性回归分析表明，东北林蛙斜率的绝对值大于黑龙江林蛙，东北林蛙的等温点低于黑龙江林蛙。与黑龙江林蛙相比，东北林蛙的体温波动较大，其体温调节能力较低。

为评价东北林蛙(Rana dybowskii)的耐寒性及其适应低温能力,并为其养殖、运输和暂养提供参考数据,本研究分别测定了25℃、4℃和0℃驯养条件下东北林蛙的过冷却点和结冰点。结果显示,东北林蛙过冷却点最低可达-2.6℃,最高为-1.4℃; 结冰点最低可达-2.3℃,最高为-1.2℃; 低温驯化可显著降低东北林蛙结冰点。基于本试验结果和相关文献分析表明,经过低温驯化的东北林蛙可通过升高血糖维持在-2℃左右的过冷却状态,其耐寒对策为避免冰冻; 在东北林蛙的人工养殖越冬、暂养、运输过程中,应尽量控制在-1℃以上以防冻死或降低其食用品质。

PDK1是PI3K/Akt信号通路中的一个重要的激酶。在哺乳动物中,PI3K/Akt信号通路是一条保守的通路,通过激活下游的因子对糖代谢、脂肪代谢以及蛋白质代谢,细胞的增殖、分化、凋亡等起调节控制作用。本研究基于东北林蛙转录组数据,从中鉴定出PDK1基因3条Unigene序列,并通过RACE法克隆了PDK1基因的全长cDNA,命名为rdPDK1,其全长为1 990 bp,开放阅读框长1 674 bp,编码557个氨基酸。进行生物信息学分析,推测该基因编码的蛋白质相对分子质量63.7 kD,等电点为7.21。该蛋白第82～344个和443～549个氨基酸是2段保守结构域STKc激酶域和PH调节结构域。同源性分析表明rdPDK1蛋白与HsPDK1蛋白氨基酸序列一致率为79%,相似率为100%; 与MmPDK1蛋白氨基酸序列一致率为80%,相似率为100%。本研究结果有望为进一步研究东北林蛙PI3K/Akt信号通路中PDK1基因的特性及功能奠定基础。

在黑龙江省伊春林区捕获的呈“红腿病”体征的东北林蛙(Rana dybowskii),从其肝脏和腹腔积液中分离出一致病菌株RY-1,通过对分离菌株形态特征、生理生化、16S rDNA基因序列和系统发育树等分析进行菌种鉴定,并用该菌株RY-1人工感染健康东北林蛙后观察其肝脏组织病理学变化。结果显示,菌株RY-1形态呈浅黄色有光泽的圆形、中央凸起、边缘光滑、直径为1.5～2 cm的菌落,革兰氏染色阴性,16S rDNA的系统发育树等结果分析判定为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。随着感染时间延长(12～72 h),肝细胞变性,呈空泡样变,细胞间隙增大,炎性细胞浸润逐渐明显。本研究分离并鉴定了1株东北林蛙源嗜水气单胞菌,并首次探讨了人工感染嗜水气单胞菌的东北林蛙病理学变化,对其疾病防控和健康养殖具有重要参考意义。

在10℃、16℃、22℃和28℃4个温度条件下,通过测量东北林蛙泄殖腔温度的方法,研究分析了东北林蛙2个不同种群在不同环境温度下的体温变化及其影响。结果表明,东北林蛙的体温随着环境温度的升高而升高,两性间体温无显著差异,但不同地理种群间体温存在一定的差异; 恒温条件下,集安种群的体温没有明显日变化节律,而伊春种群的体温存在显著的日节律变化; 伊春种群具有较低的体温和较强的体温调节能力。由此可知,环境温度是影响东北林蛙不同地理种群的体温及生理体温调节能力的主要因素之一。

为初步了解林蛙油重金属的污染现状,采集东北林蛙、黑龙江林蛙和中国林蛙的林蛙油,以湿法消化法消化,利用荧光比色法测定锡含量、原子吸收法分别检测镉、铬、铜和铅的含量,并采用单因子污染指数及每周可耐受摄入量分别评价5种重金属在3种林蛙油中的污染程度并对其食用安全进行评价。结果表明,该批次样品中东北林蛙蛙油重金属含量分别为锡10～20、镉50～90、铬670～720、铜100～250和铅60～90 μg/kg; 黑龙江林蛙蛙油重金属含量分别为锡12～22、镉80～110、铬700～820、铜150～250和铅80～100 μg/kg; 中国林蛙蛙油重金属含量分别为锡2～10、镉30～60、铬590～700、铜800～130和铅30～60 μg/kg,5种金属分别在3种林蛙油内的含量差异显著。单因子污染指数结果显示3种林蛙油中锡、铅的含量均未超过轻度污染指数; 铬、镉的含量,除中国林蛙蛙油中铬为轻度污染,其余皆为中度污染,根据样本数据可知仅黑龙江林蛙油镉超标40%,其余皆在食品污染物限量国家标准范围之内。根据每周可耐受摄入量评定,其结果显示3种林蛙油的食用风险依次是铬>镉>铜>铅>锡。因此本批次所检测的林蛙油可食性良好,但仍有必要监测林蛙油中镉、铬的含量。

为了探索东北林蛙在越冬期内生殖器官的生理变化,本研究自2013年10月至翌年3月,每月采集雌、雄成体林蛙各10只,测定雄蛙的体重、睾丸重、脂肪体重; 雌蛙的体重、输卵管重和卵巢重,并进行测定器官的系数计算和相关性分析。结果表明:雄性林蛙睾丸的重量和系数在越冬期里无显著变化(P>0.05),而脂肪体的重量和系数自1月之后显著降低(P<0.01)。雌性林蛙卵巢的重量和系数自1月开始显著增加(P<0.01); 而输卵管系数在越冬的第1个阶段(11月～12月间)显著上升(P<0.01)。相关性分析证明脂肪体是雄蛙的主要越冬能量来源,而输卵管则是卵巢中卵子发育的主要营养物质来源。本研究揭示了林蛙越冬期生殖生理基本规律,并为林蛙养殖提供科学依据。

目的:对具有广谱抑菌活性的东北林蛙(Rana dybowskii)重组抗菌肽dybowskin-1ST进行热稳定性、酸碱稳定性、局部过敏反应(Arthus反应)及溶血活性分析,为进一步摸清重组肽的理化特性及其应用提供科学依据。方法:将重组抗菌肽dybowskin-1ST分别置于不同环境温度(25～100℃)及不同酸碱环境(pH2～pH12)中处理4 h,观察其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)及大肠杆菌(Escherichia coli)的抑菌环直径,确定其稳定性; 用不同浓度梯度的重组dybowskin-1ST进行溶血试验和局部过敏反应(Arthus反应)。结果:1.重组dybowskin-1ST在25～100℃温度及pH2～pH12环境下均有抑菌活性,其中,最适环境温度为25℃; 重组dybowskin-1ST在pH3～pH7范围对Staphylococcus aureus抑菌活性较强(抑菌环直径为12.77～13.17 mm),在pH3～pH8范围对Escherichia coli抑菌性较强(抑菌环直径为12.63～13.37 mm)。2.溶血试验结果显示,重组dybowskin-1ST对家兔红细胞的溶血率在0.14%～4.4%; 小鼠Arthus氏试验观察其腹部皮下重组dybowskin-1ST注射部位红肿不明显,无出血、坏死等炎性反应。结论:实验结果显示重组dybowskin-1ST具有较好稳定性、低溶血性及低致敏性,为其应用提供科学依据。

由于环境、气候的恶化以及疾病的侵害,全球两栖动物种群数量呈现出整体衰退的趋势,其中虹彩病毒属蛙病毒科的蛙病毒是不可忽略的原因之一。环介导等温扩增技术(loop-mediated-isothermal-amplification,LAMP)是一种新型的核酸扩增技术,具有特异性强、快速、简便等特点,本研究利用LAMP技术,开发了针对中国东北林蛙种蛙蛙病毒的快速检测方法,针对蛙病毒MCP基因设计出能特异识别靶序列上6个位点的4条特异性引物,在链置换聚合酶(Bst 酶)的作用下,62 ℃扩增30 min。通过对实验参数的优化,扩增后病毒的最低检出数可达到102个拷贝。该方法可用于东北林蛙养殖厂种蛙蛙病毒的临床快速检测,保证种蛙的存活质量和数量。

本文利用11个微卫星多态位点检测东北林蛙（Rana dybowskii）的遗传多样性和种群遗传结构。6个东北林蛙种群的75个个体分布于中国的小兴安岭和长白山地区。11个位点在所有种群中得到的等位基因数为2～10个不等,平均5.6个;平均期望杂合度（HE）为0.572,属于中度多态。基因分化系数（FST）分析表明小兴安岭和长白山地区的种群间遗传分化显著（P〈0.001）,基于Nei＇s DA遗传距离构建的UPGMA系统树和AMOVA的结果进一步验证了结论的准确性。因此, 建议将分布于小兴安岭和长白山的东北林蛙划分为两个单独的管理单元加以保护和管理。